DNA/RNA提取試劑盒（吸附柱法）的主要檢測方法

更新時(shí)間：2022-06-13

點(diǎn)擊次數(shù)：5426

DNA/RNA提取試劑盒（吸附柱法）可以從多種樣本中提取DNA/RNA，包括血清、血漿、動(dòng)物組織、體液等。處理的樣本通過加入裂解液后，把混合物移至吸附柱中，之后可以通過洗滌、洗脫，即可分離出病毒DNA/RNA。本試劑盒提取的核酸可以用于Real-time PCR，Northern Blot，Blotting Hybridization ，cDNA library Construction等實(shí)驗(yàn)。

檢測方法：

一、樣本前處理

動(dòng)物、植物組織：將樣本用生理鹽水或PBS緩沖液充分研磨，離心取上清后進(jìn)行樣本提取操作。

血清、血漿、體液等樣本：直接進(jìn)行樣本提取操作（不足200μL，可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足200μL）。

二、樣本提取操作：

1.取200μL處理好的樣本（不足200μL，可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足200μL），加入500μL裂解液，振蕩30秒，室溫靜止2分鐘。注：針對(duì)難裂解樣本，室溫靜置時(shí)間可延長至5分鐘。

2.把上述混合液轉(zhuǎn)移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時(shí)盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免阻塞吸附膜），10000rpm離心1分鐘，棄去套管中液體。

3.向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液，12000rpm離心30秒，棄去套管中液體。

4.向吸附柱中加入500μL洗滌液，12000rpm離心30秒，棄去套管中液體。

5.向吸附柱中加入500μL洗滌液，12000rpm離心30秒，棄去套管中液體。

6. 12000rpm再次離心2分鐘。

7.把吸附柱轉(zhuǎn)移至新的1.5mL滅菌離心管中，向吸附柱中加入 50μL洗脫液，并于室溫溫育2分鐘。